自2012年CRISPR基因编辑技术发明后，基因编辑领域得到了几何级数的发展。DNA和RNA编辑技术日新月异，给科研、农业、畜牧业、人类疾病诊疗领域带来了颠覆性的变化，CRISPR2020年还获得了诺贝尔奖。

在过去的十年里，使用这种基因编辑技术的人类体细胞基因治疗产品发展迅速，通过不同的交付工具将不同的基因编辑系统导入特定的靶细胞，并改变特定的基因来治疗疾病。在遗传疾病中正在进行数十项临床试验(如输血依赖型b-地中海贫血、镰刀性贫血、甲状腺素淀粉样变性病等)和癌症（如通用型CAR-T等）这些方面显示了显著的初步临床疗效，没有发现显著的基因编辑毒性。

走在最前的CRISPR Therapeutics和Vertex计划今年提交其治疗输血依赖型b-地中海贫血基因编辑造血干细胞产品上市申请。为了帮助这些产品从实验室转变为临床和工业化，FDA2012年3月15日，《包括人类基因组编辑的人类基因治疗产品》指南草案发布，系统建议如何评估这些基因组编辑产品的安全性和质量，解决这些产品的潜在风险。

指导原则共17页，主要针对基因编辑疗法CMC、临床前研究、临床研究等问题已标准化，特别是一些与基因组编辑方法相关的具体风险，包括目标编辑、目标编辑和目标编辑的意外后果，以及目标编辑和目标编辑未知的长期影响，对人体细胞基因编辑治疗产品的有效和标准化研发具有重要的指导意义。

如何理解指南的相关内容，邀请写意与写意细胞基因治疗俱乐部副主席、博雅辑因CEO魏东博士做了分析解读。

1、一般考虑产品开发

在选择特定的基因组编辑技术时，应考虑作用机制（MOA）、特异性靶向DNA序列能力，以及优化基因组编辑组件以提高效率、特异性或稳定性的能力。基因组编辑可能会导致非意图DNA插入或删除，造成事故后果。

建议考虑基因组的修改程度（即治疗修改阈值），以达到预期的治疗效果。临床数据可以支持给定的治疗修改阈值。如果没有临床数据支持治疗修改阈值，建议提供达到修改阈值的潜在有效性的理由。

基因组编辑组件的交付方法应考虑每种方法的优点和局限性（如核酸量、靶向交付效率、基因组编辑组件的持久性和稳定性）。某些基因组编辑组件（如核酸酶）的持久性越长，非意向基因组修改的风险就越高，特别是脱靶编辑和染色体重排列。为了限制潜在的脱靶编辑程度，基因组编辑组件的持续时间应尽可能缩短到预期的基因组修改所需的时间。

2、CMC建议

建议优化基因组编辑组件，尽量减少脱靶基因修饰的可能性。您可以优化编辑器或目标元素，也可以编辑基因组组组件，如导游RNA，优化抑制降解。

通过纳米颗粒DNA、RNA和/或蛋白质在体内给药时，基因组编辑组件被认为是活性药物成分或原料药。当质粒或载体直接在体内表达基因组编辑组件时，最终配方中编码基因组编辑组件的质粒或载体被认为是DP。

对于后期研究和上市许可，基因组编辑组件必须遵循CGMP标准（21CFR Parts 210 and 211)生产应特别考虑试剂质量、生产过程和分析方法的控制。建议对每个基因组编辑组件进行适当的测试。除了评估每个组件的无菌、识别、纯度和功能外，还应根据情况包括其他测试，如工艺残留测试。建议评估基因组编辑组件的稳定性。所有基因组编辑组件（如冻干和复溶材料，如适用）都应进行稳定性研究。

对DP详细描述了制造过程和所有过程控制，包括过程图和详细描述。提供制造过程中使用的试剂清单和分析证书。制定无菌但不能终端灭菌的DP，应提供确保无菌处理的详细措施。

对DP详细描述了测试计划分析方法，包括测试的准确性、精度、灵敏度和特异性，以及比较和参考材料，以确保适当的测试性能。应根据初始材料、生产工艺、所需的最终产品属性和临床前研究制定DP质量标准，建议在DP在稳定性研究中增加了效力测定项。如果使用替代效力测试，应提供替代效力结果和结果GE功能结果之间的相关性数据。

3、考虑临床研究

所选动物种属和/或模型应证明对试验基因组编辑产品或种属特异性替代产品的生物反应。试验基因组编辑产品的临床前安全研究应尽可能纳入计划中的临床试验要素（如剂量范围、ROA、给药装置、给药计划、评价终点）。研究设计应足够全面，能够识别、表达和量化潜在的局部和全身毒性、攻击（即急性或延迟）和潜在的缓解，以及剂量水平对这些发现的影响。

由于动物与人之间的基因组序列不同，POC当和/或安全研究不能提供实验性人类基因组编辑产品信息时，可以使用替代基因组编辑产品(例如，替代人类元素，包括基因组编辑组件、启动子和基因组编辑产品中特定元素的转基因)。应提供使用替代基因组编辑产品的科学理由，并建立替代产品与实验性人类基因组编辑产品之间的生物相关性。

多重正交方法（如计算机、生化、细胞分析），包括无偏全基因组分析，用于识别潜在的脱靶点。应使用多个供体的目标人体细胞类型进行分析。

4、考虑临床研究

临床试验设计包括患者选择、有效、安全的产品给药方法（包括基于数据的配量、给药方案和治疗方案）、充分的安全监测和适当的终点选择。建议对接受人类基因组编辑产品的临床试验受试者进行长期随访，以评估临床安全性。

研究人群：人类基因组编辑产品可能存在重大风险和不确定的潜在好处。这类产品的第一次人体试验通常是没有其他或可接受治疗方案的受试者。患有严重或晚期疾病的受试者可能更愿意接受人类基因组编辑产品的风险。这些受试者可能会经历更多AE或者正在接受伴随治疗，使得安全性和有效性数据难以解释。因此，在某些情况下，轻度或中度疾病的受试者可能适合第一次人类临床研究。

剂量及给药方案：根据类似产品的临床经验指导，包括基因组编辑或未编辑的细胞或基因治疗产品。

治疗计划：建议通过受试者交错入组，规定连续受试者产品给药队列与队列之间的时间间隔，减缓与基因组编辑产品相关的预期风险。交错间隔应足以监测急性和亚急性AEs，在用相同剂量治疗其他受试者之前，或在随后治疗的受试者增加剂量之前。交错间隔还应考虑人类基因组编辑产品预期活性的持续时间。

监测与随访：充分监控脱靶编辑，充分评估靶位和脱靶编辑的意外结果。基因组编辑产品给药时，不了解靶点和非靶点编辑的预期和非预期的长期影响。建议给药后至少15年进行长期随访。

儿童研究的特殊考虑：对于涉及儿童的临床研究，相关风险大于最低风险，机构审查委员会必须通过预期的儿童临床利益进行审查，以说明这些风险的合理性。直接受益的预期应基于证据（例如，来自成人或适当的动物模型）。建议首先设立成人受试者的初始队列，获取安全性和可行性、生物活性和初步疗效数据，支持儿科受试者的合理性。根据特定疾病，青少年应在进入小组前进入小组。